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SPE固相萃取柱 基本方法

SPE實(shí)質(zhì)上是一種液相色譜分離，所用的吸附劑也與液相色譜固定相相同，只是在粒度上有所區(qū)別。SPE的一般做法是：利用選擇性吸附于選擇性洗脫的色譜分析原理，使液體樣品通過吸附劑，保留其中的分析物，用適當(dāng)強(qiáng)度溶劑洗除雜質(zhì)，然后用少量溶劑洗脫分析物，達(dá)到快速分離凈化與濃縮的目的。也有選擇性吸附干擾雜質(zhì)，而讓分析物洗除，或同時(shí)吸附雜質(zhì)和分析物，在使用合適的溶劑選擇性洗脫分析物的做法。

三種常見固相萃取柱的操作方法介紹：

一、反相萃取柱操作

從極性基體中提取非極性的樣品

1、活化：以3—5毫升甲醇淋洗萃取柱;以3—5毫升去離子水(或緩沖液)淋洗萃取柱并保持萃取柱濕潤

2、上樣：以合適的流速使樣品均勻通過萃取柱

3、清洗：以5毫升適當(dāng)極性的溶劑洗脫吸附樣品的萃取柱(常用的有純水,緩沖液,水/有機(jī)溶劑混合液)

4、洗脫：將被測(cè)樣品,用1—5毫升非極性溶劑分批洗脫至收集容器

二、正相萃取柱操作

從非極性基體中提取極性的樣品

1、活化：3—5毫升非極性溶劑淋洗萃取柱

2、清洗：以5毫升適當(dāng)非極性的溶劑洗脫吸附樣品的萃取柱

3、洗脫：將被測(cè)樣品,用1—5毫升極性溶劑分批洗脫至收集容器

三、離子交換萃取柱

提取帶電荷的樣品

1、活化：以3—5毫升去離子水/或低離子強(qiáng)度的緩沖液淋洗萃取柱

2、上樣：以較低的流速,使樣品均勻通過萃取柱

3、清洗：5毫升去離子水/或低離子強(qiáng)度的緩沖液淋洗萃取柱

4、洗脫：將被測(cè)樣品,用1—5毫升高離子強(qiáng)度的緩沖液洗脫至收集容器

四、固相萃取柱的選擇

1：石墨化炭及復(fù)合SPE系列(農(nóng)殘專用)，固相萃取柱

2：聚合物基質(zhì)SPE系列(HLB-MCX-MAX-WCX-WAX)固相萃取柱

3：硅膠基質(zhì)正相SPE系列(硅膠-氟硅土-氧化鋁-Diol-PSA-氨基)固相萃取柱

4：硅膠基質(zhì)離子交換SPE系列(SAX-SCX-PRS)固相萃取柱

5：硅膠基質(zhì)反相SPE系列（C18-C8-CN)固相萃取柱

6：前處理及分析應(yīng)用（固相萃取）固相萃取柱

7：C8-SCX-SAX混合SPE系列（藥物代謝及濫用)固相萃取柱

以下是SPE固相萃取柱種類簡(jiǎn)介

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C18固相萃取柱

c18固相萃取小柱是一種從各種基質(zhì)中凈化和濃縮分析物的技術(shù).SPE 可以改進(jìn)并簡(jiǎn)化分離，延長(zhǎng)色譜柱壽命以及提高檢測(cè)限。

c18固相萃取小柱基于鍵合的反相（二甲基十八碳硅烷）、不規(guī)則硅膠（硅膠基）顆粒。這種非極性、未封端的吸附劑提供了與表面硅醇基相關(guān)聯(lián)的額外的極性相互作用。同時(shí)，與相應(yīng)的封端的吸附劑相比，增強(qiáng)了對(duì)堿性化合物的保留。建議將其用作極性和非極性分析物的通用。

1. 血液,血漿，尿液中藥物及其代謝物；
2. 蛋白，DNA大分子的樣品的脫鹽；
3. 環(huán)境水樣中的有機(jī)物的富集；
4. 飲料中的有機(jī)酸；
5. 與反相液相色譜柱的相似行為，具體如：抗菌素,***酸鹽,酞嗪,***,藥物,染料,芳香油,脂溶性維生素,殺真菌劑,鋤草劑,農(nóng)藥,碳水化合物,對(duì)羥基甲苯酸取代酯,苯酚, 鄰苯二甲酸酯,類固醇,表面活化劑,茶堿,水溶性維生素等的提取凈化。